Object's details: Ocena działania podchlorynu i nadtlenoazotynu na wybrane elementy układu hemostazy

Provider:Repozytorium Uniwersytetu Łódzkiego

Description

Title:
Ocena działania podchlorynu i nadtlenoazotynu na wybrane elementy układu hemostazy
Creator:
Matczak, Justyna
Contributor:
Uniwersytet Łódzki;
justyna.matczak@biol.uni.lodz.pl
Description:
Fibrynogen i plazminogen to kluczowe białka hemostazy, która zapewnia płynność krwi oraz zapobiega jej utracie, jeśli nastąpi przerwanie ciągłości naczyń krwionośnych. Białka te są narażone na działanie RFT i RFA, ulegają licznym modyfikacjom oksydacyjnym. Przekłada się to na zmianę ich struktury trzeciorzędowej, funkcji biologicznych oraz prowadzi do zaburzenia równowagi między układem krzepnięcia i fibrynolizą, a w konsekwencji dochodzi prawdopodobnie do rozwoju chorób układu sercowo-naczyniowego, m.in. zakrzepicy. Celem prowadzonych badań było (1) określenie wpływu modyfikacji Fg i Plg, indukowanych przez OCl- i ONOO- na właściwości prozakrzepowe, fizyko-chemiczne i lityczne fibryny oraz aktywność amidolityczną Plm. Dodatkowym zadaniem (2) było opracowanie warunków metody immunoenzymatycznej do oznaczenia stężenia znitrowanego Fg w osoczu. Ten prosty test w przyszłości może stać się niezawodnym narzędziem, wykorzystywanym w badaniach przesiewowych do określenia poziomu ryzyka rozwoju zakrzepicy. Dodatkowo (3) poszukiwano i wyselekcjonowano związki, których zadaniem była ochrona antyoksydacyjna badanych białek przed wpływem OCl- i ONOO-. W badaniach wykorzystywano wybrane polifenole oraz nitroksydy. Badane oksydanty zmieniały strukturę trzeciorzędową Fg, prowadząc do tworzenia agregatów HMW, nie wpływały natomiast na obraz elektroforetyczny Plg. Ponadto powodowały tworzenie w obu białkach markerów stresu oksydacyjnego, takich jak: grupy karbonylowe, 3-nitrotyrozyny, dityrozyny, utlenianie reszt Trp. OCl- niemalże całkowicie hamował proces polimeryzacji monomerów fibryny, ONOO- wykazywał słabsze działanie. W konsekwencji powstawał włóknik o patologicznych, prozakrzepowych właściwościach, zbudowany z cienkich, ściśle upakowanych włókien. Efekt hamujący OCl- na konwersję plazminogenu do plazminy był silniejszy niż ONOO-. Fg to białko altruistyczne, przejmujące na siebie atak RFT. W badaniach potwierdzono, że jest ono bardziej podatne na modyfikacje niż Plg. W największym stopniu zmianom ulegał łańcuch Aα Fg. Stosowane polifenole chroniły zarówno Fg, jak i Plg przed wpływem oksydantów. Silniejsze działanie ochronne (-)-epikatechiny obserwowano w próbach z OCl-, natomiast kwercetyny w próbach z ONOO-. Nitroksydy zapobiegały modyfikacjom indukowanym przez ONOO-, nie chroniąc badanych białek przed wpływem OCl-. Najsilniej spośród badanych nitroksydów w próbach z Fg działał TEMPO. W próbach z Plg najsilniejsze działanie ochronne wykazywał 4-Acetamido-TEMPO.;
Fibrinogen and plasminogen are the key hemostasis proteins. Hemostasis provides blood flow and prevents it from losing as a result of injury. These proteins are exposed to reactive oxygen and nitrogen species, undergoing numerous oxidative modifications. Oxidative modifications lead to change their structures, biological functions, and imbalances between the coagulation system and fibrinolysis. As a consequence of these changes, cardiovascular diseases are developed, such as thrombosis. The aim of the study was (1) to determine the effect of Fg and Plg modifications, induced by OCl- and ONOO-, on pro-thrombotic, biochemical and lytic properties of fibrin and amidolytic activity of Plm. Additional goal (2) was to develop conditions an enzyme-linked immunosorbent assay to determine the concentration of nitrated fibrinogen in plasma. This simple test can become a reliable tool used in screening study to determine the risk of thromboembolic complications in the future. In addition, (3) my aim was to find and select antioxidant compounds, that protect Fg and Plg against OCl- and ONOO- action. Polyphenols and nitroxides were used in the studies. Oxidants altered the Fg structure, leading to formation of HMW aggregates, but did not affect on the Plg structure. In addition, OCl- and ONOO- generated oxidative stress markers in both proteins, such as: carbonyl proteins, 3-nitrotyrosine, dityrosine, tryptophan residues modifications. Hypochlorite almost completely inhibited polymerization of fibrin monomers, ONOO- has a weaker effect. The resulting, fibrin clot has pathological, pro-thrombotic properties. It consists of thin, tightly packed fibrin fibers. OCl- inhibited the conversion of plasminogen to plasmin stronger than ONOO-. Fg is more susceptible to oxidative attack, than Plg. The fibrinogen Aα chain is most vulnerable to change. Polyphenols protect both proteins from oxidative modifications. (-)-Epicatechin had a stronger protein-protecting effect against hypochlorite action and quercetin against peroxynitrite action. Nitroxides protected proteins only against ONOO- actions. The TEMPO protected fibrinogen most effectively against the effects of peroxynitrite. In tests with Plg, the most protective effect was 4-Acetamido-TEMPO.;
Badania finansowane z dotacji celowej dla młodych naukowców oraz uczestników studiów doktoranckich oraz badań statutowych Katedry Biochemii Ogólnej: 506/1136.
Object availability:
free access
Rights:
Justyna Matczak;
Uznanie autorstwa-Użycie niekomercyjne-Bez utworów zależnych 3.0 Polska;
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/pl
Date:
2017.10.26;
2017;
2018.01.30
Type:
PhD/Doctoral Dissertation
Language:
Polish
Format:
application/pdf
Subject:
fibrynogen;
plazminogen;
podchloryn;
nadtlenoazotyn;
modyfikacje oksydacyjne białek;
układ krzepnięcia;
zakrzepica
Identifier: http://hdl.handle.net/11089/23078
Data provider:
Repozytorium Uniwersytetu Łódzkiego

Similar objects

Ocena działania podchlorynu i nadtlenoazotynu na wybrane elementy układu hemostazy

Creator:Matczak, Justyna

Date:2017.10.26 | 2017 | 2018.01.30

Type:text

Wpływ melatoniny i resweratrolu na zmiany struktury i funkcji dehydrogenazy aldehydu 3-fosfoglicerynowego i dehydrogenazy mleczanowej indukowane reaktywnymi formami tlenu i azotu

Creator:Strumiłło, Joanna

Date:2020.11.16 | 2020 | 2021.06.30

Type:text

Lokalizacja fosforu w cząsteczce fibrynogenu niektórych ssaków i ptaków domowych

Creator:Cierniewski, Czesław

Date:2018.03.23 | 1973

Type:text

Correlation between plasma level of urokinase-type plasminogen activator, its receptor in patients with multiple myeloma

Date:2000

Type:image

Ein Beitrag zum Thrombose-Embolie-Problem an Hand des Krankenmaterials der Breslauer Universitätsfrauenklinik in den Jahren 1931-1941.

Creator:Poersch, Christine (1918-?)

Date:1942-01-01-1942-12-31 | 1942

Type:text

Molekularne mechanizmy wzmożonej aktywności pro-zakrzepowej płytek krwi w stwardnieniu rozsianym

Creator:Dziedzic, Angela

Date:2021.07.02 | 2021 | 2021.11.30

Type:text

Okołooperacyjna ocena hemostazy u chorych poddawanych rekonstrukcji brzusznego odcinka aorty

Creator:Zwaruń Damian

Type:text

Can I use it?:seek permission

Proste testy koagulologiczne w stanach zagrożenia rozsianym wykrzepianiem wewnątrznaczyniowym u dzieci

Creator:Kaczmarek-Kanold, Małgorzata Anna

Type:text

Can I use it?:seek permission

Federacja Bibliotek Cyfrowych

Object's details: Ocena działania podchlorynu i nadtlenoazotynu na wybrane elementy układu hemostazy

Description

Similar objects